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SRSF2-P95H decreases JAK/STAT signaling in hematopoietic cells and delays myelofibrosis development in mice

SRSF2-P95H突变减少小鼠造血细胞中的JAK2/STAT信号并且延缓小鼠骨髓纤维化

（22级硕士路娅婷）

2022年发表于leukemia。本篇文章与上一篇文章有相似之处，在此放在一起研究学习。

一、 作者介绍

Eric Solary，巴黎萨克雷大学医学院血液病学教授，研究正常单核细胞的功能和慢性粒细胞白血病的病理生理学，在国际科学杂志上发表了350多篇论文，还曾担任法兰西岛癌症研究中心的科学主任。

二、 研究背景

Scl - CreERt是一种利用Scl（干细胞白血病基因）启动子驱动的Cre重组酶，在多种组织和细胞类型中表达，尤其在早期造血干细胞和血管内皮细胞中。

三、 研究结果

一）Srsf2P95H共突变延迟Jak2V617F诱导的骨髓纤维化

与Jak2V617F小鼠相比，Jak2v617F/Srsf2P95H+小鼠外周血中白细胞计数（WBC）、淋巴细胞计数（Lymits）、中性粒细胞计数（Neurphis）、单核细胞计数（Monocytes）、B细胞计数（B - Cells）等指标在不同时间点有不同程度变化，如在某些时间点WBC、Neurphis等指标在Jak2v617F/Srsf2P95H+小鼠中较低；骨髓中巨核细胞数量（MK per field in BM）和平均倍性（Mean ploidy）在早期降低，但16 - 24周后提高；血小板生成素受体MPL表达在Jak2v617F/Srsf2P95H+小鼠中未出现像Jak2V617F小鼠那样的降低，表明Srsf2P95H共突变延迟了Jak2V617F诱导的骨髓纤维化。

（二）Srsf2P95H共突变降低Jak2V617F细胞竞争力

将CD45.2 Jak2/Srsf2小鼠与CD45.1小鼠按1:1比例进行竞争性骨髓移植，30周后分析。结果显示，Jak2/Srsf2小鼠细胞在骨髓和脾脏中的比例低于Jak2小鼠，如骨髓中LT - HSC、ST - HSC等亚群比例在Jak2/Srsf2小鼠中较低，表明Srsf2P95H共突变降低了Jak2V617F细胞竞争力，且这种降低具有时序依赖性。

将CD45.2 Jak2/Srsf2小鼠（30%）与CD45.1小鼠（70%）进行竞争性骨髓移植，在不同时间点分析。结果发现，Jak2/Srsf2小鼠细胞在骨髓中的比例低于Jak2小鼠，如在移植后不同时间点，Jak2/Srsf2小鼠骨髓中SLAM阳性细胞比例低于Jak2小鼠；在连续移植引起的应激条件下，Jak2/Srsf2小鼠造血干细胞未像Jak2小鼠那样耗竭，进一步证明Srsf2P95H共突变降低了Jak2V617F细胞竞争力。

（三）Srsf2P95H干扰Jak2V617F诱导的巨核细胞表型

他莫昔芬诱导8周和16 - 24周后，与Jak2V617F小鼠相比，Jak2V617F/Srsf2P95H+小鼠骨髓中巨核细胞数量（MK per field in BM）和平均倍性（Mean ploidy）在早期降低，但16 - 24周后提高；血管性血友病因子（vWF）染色的BM切片定量分析显示巨核细胞数量在不同时间点有相应变化。Srsf2P95H共突变阻止了通常在Jak2V617F细胞表面观察到的血小板生成素受体MPL表达的降低。

（四）Srsf2P95H下调巨核细胞信号通路

从移植并在他莫昔芬处理后8周处死小鼠的骨髓中分选巨核细胞，进行RNA测序。基因集富集分析（GSEA）表明，与Jak2V617F细胞相比，Jak2V617F/Srsf2P95H中的多个信号通路（包括JAKSTAT、TNF和TGFβ信号通路）下调，其中IL6 - JAK - STAT3信号通路在双突变的巨核细胞中下调。

（五）Srsf2P95H下调romiplostim诱导的骨髓纤维化

通过皮下给予高剂量romiplostim（一种血小板生成素受体激动剂）诱导MF小鼠模型，分析不同基因型小鼠的变化。与Scl - Cre小鼠相比，Scl - Cre Srsf2小鼠在接受romiplostim处理后，骨髓纤维化相关指标变化不同，如脾脏重量增加幅度较小等，表明Srsf2P95H基因型在JAK/STAT高信号传导（由Jak2突变或MPL刺激诱导）时负面干扰MF诱导。

四、研究讨论

1. 对分选的巨核细胞进行RNA测序发现，当两种突变结合时，剪接事件的数量增加。

2. 聚焦JAK/STAT通路，Srsf2P95H促进了JAK2外显子14跳跃。