BALB/C小鼠用TNBS+乙醇造模溃疡性结肠炎失败原因?
第一次做结肠炎造模实验练手,8只BALB/C小鼠没有禁食,配置的是TNBS-25%乙醇,按100mg/kg,小鼠均用4cm灌胃针直肠灌肠给药,给药后悬挂倒立3min,第二天到接下来的一周内小鼠出现了应该有的体重趋势和大便性状改变(窜稀,便血),8只死亡2只,其余处死后取结肠发现,造模效果不错。于是开始了正式的预实验。正式预实验,10只鼠给药前禁食了24h,同样用4cm灌胃针给药,给药后悬挂倒立60s(开始考虑到没禁食延长了悬挂时间),第二天小鼠没有出现一开始不禁食练手的那种趋势,体重反而上升,大便性状也没有任何改变,一开始觉得是因为禁食导致短期增加饮食造成体重上升,于是继续观察了3天,体重依然是上升,随机抓了两只给药鼠和1只空白组处死解剖,发现直,结肠并没有出现溃疡,和空白比几乎没有任何变化,以为是操作问题问了老师说我实验操作没问题。于是剩余8只重新禁食给药,后面依然没有出现想要的结果,造模失败。重新换了一批新鼠,按前面的步骤重新做了一次依然造模不成功。于是咨询了带我的老师,他让我禁食48h再做一次,并且延长悬挂时间到2min,重新造模了5只,后面连续2天发现,只有一只体重减轻并且窜稀,精神萎靡,其余依然正常。考虑要不要和一开始练手一样,不禁食再做一次,可是按正常要求都需要禁食,TNBS已经浪费了1/3了。