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Cryo-electron microscopy of membrane proteins.
Methods ( IF 4.8 ) Pub Date : 2018-09-01 , DOI: 10.1016/j.ymeth.2018.04.018 Nopnithi Thonghin , Vasileios Kargas , Jack Clews , Robert C. Ford
Methods ( IF 4.8 ) Pub Date : 2018-09-01 , DOI: 10.1016/j.ymeth.2018.04.018 Nopnithi Thonghin , Vasileios Kargas , Jack Clews , Robert C. Ford
Membrane proteins represent a large proportion of the proteome, but have characteristics that are problematic for many methods in modern molecular biology (that have often been developed with soluble proteins in mind). For structural studies, low levels of expression and the presence of detergent have been thorns in the flesh of the membrane protein experimentalist. Here we discuss the use of cryo-electron microscopy in breakthrough studies of the structures of membrane proteins. This method can cope with relatively small quantities of sample and with the presence of detergent. Until recently, cryo-electron microscopy could not deliver high-resolution structures of membrane proteins, but recent developments in transmission electron microscope technology and in the image processing of single particles imaged in the microscope have revolutionized the field, allowing high resolution structures to be obtained. Here we focus on the specific issues surrounding the application of cryo-electron microscopy to the study of membrane proteins, especially in the choice of a system to keep the protein soluble.
中文翻译:
膜蛋白的冷冻电子显微镜。
膜蛋白占蛋白质组的很大一部分,但其特征对于现代分子生物学中的许多方法(通常是在考虑可溶性蛋白质的情况下开发)来说是有问题的。对于结构研究,低表达水平和去污剂的存在一直是膜蛋白实验者肉体中的刺。在这里,我们讨论了冷冻电子显微镜在膜蛋白结构的突破性研究中的使用。这种方法可以处理相对少量的样品和洗涤剂的存在。直到最近,冷冻电子显微镜还不能提供膜蛋白的高分辨率结构,但最近在透射电子显微镜技术和显微镜中成像的单个粒子的图像处理方面的发展已经彻底改变了该领域,从而可以获得高分辨率的结构。在这里,我们关注围绕低温电子显微镜在膜蛋白研究中的应用的具体问题,特别是在选择系统以保持蛋白质可溶方面。
更新日期:2018-09-01
中文翻译:
膜蛋白的冷冻电子显微镜。
膜蛋白占蛋白质组的很大一部分,但其特征对于现代分子生物学中的许多方法(通常是在考虑可溶性蛋白质的情况下开发)来说是有问题的。对于结构研究,低表达水平和去污剂的存在一直是膜蛋白实验者肉体中的刺。在这里,我们讨论了冷冻电子显微镜在膜蛋白结构的突破性研究中的使用。这种方法可以处理相对少量的样品和洗涤剂的存在。直到最近,冷冻电子显微镜还不能提供膜蛋白的高分辨率结构,但最近在透射电子显微镜技术和显微镜中成像的单个粒子的图像处理方面的发展已经彻底改变了该领域,从而可以获得高分辨率的结构。在这里,我们关注围绕低温电子显微镜在膜蛋白研究中的应用的具体问题,特别是在选择系统以保持蛋白质可溶方面。