BACKGROUND & AIMS Alcoholic liver disease (ALD) is a major cause of morbidity and mortality worldwide. However, the cellular defense mechanisms underlying ALD are not well understood. Recent studies highlighted the involvement of chaperone-mediated autophagy (CMA) in regulating hepatic lipid metabolism. Sorting nexin (SNX)-10 has a regulatory function in endolysosomal trafficking and stabilisation. Here, we investigated the roles of SNX10 in CMA activation and in the pathogenesis of alcohol-induced liver injury and steatosis. METHODS Snx10 knockout (Snx10 KO) mice and their wild-type (WT) littermates fed either the Lieber-DeCarli liquid alcohol diet or a control liquid diet, and primary cultured WT and Snx10 KO hepatocytes stimulated with ethanol, were used as in vivo and in vitro ALD models, respectively. Activation of CMA, liver injury parameters, inflammatory cytokines, oxidative stress and lipid metabolism were measured. RESULTS Compared with WT littermates, Snx10 KO mice exhibited a significant amelioration in ethanol-induced liver injury and hepatic steatosis. Both in vivo and in vitro studies showed that SNX10 deficiency upregulated lysosome-associated membrane protein type 2A (LAMP-2A) expression and CMA activation, which could be reversed by SNX10 overexpression in vitro. LAMP-2A interference confirmed that the upregulation of Nrf2 and AMPK signalling pathways induced by SNX10 deficiency relied on CMA activation. Pull-down assays revealed an interaction between SNX10 and cathepsin A (CTSA), a key enzyme involved in LAMP-2A degradation. Deficiency in SNX10 inhibited CTSA maturation and increased the stability of LAMP-2A, resulting in an increase in CMA activity. CONCLUSIONS SNX10 controls CMA activity by mediating CTSA maturation, and, thus, has an essential role in alcohol-induced liver injury and steatosis. Our results provide evidence for SNX10 as a potential promising therapeutic target for preventing or ameliorating liver injury in ALD. LAY SUMMARY Alcoholic liver disease is a major cause of morbidity and mortality worldwide. Recent studies highlight the involvement of chaperone-mediated autophagy (CMA) in regulating hepatic lipid metabolism. Our study reveals that deficiency of sorting nexin (SNX) 10 increases the stability of LAMP-2A by inhibiting cathepsin A maturation, resulting in the increase of CMA activity and, thus, alleviates alcohol-induced liver injury and steatosis.

中文翻译：

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SNX10 通过调节分子伴侣介导的自噬激活来介导酒精性肝损伤和脂肪变性。

背景和目的 酒精性肝病 (ALD) 是全世界发病率和死亡率的主要原因。然而，ALD 背后的细胞防御机制尚不清楚。最近的研究强调了分子伴侣介导的自噬 (CMA) 参与调节肝脏脂质代谢。排序连接蛋白 (SNX)-10 在内溶酶体运输和稳定中具有调节功能。在这里，我们研究了 SNX10 在 CMA 激活和酒精性肝损伤和脂肪变性的发病机制中的作用。方法 Snx10 敲除 (Snx10 KO) 小鼠和它们的野生型 (WT) 同窝仔鼠喂食 Lieber-DeCarli 液体酒精饮食或对照液体饮食，以及用乙醇刺激的原代培养的 WT 和 Snx10 KO 肝细胞，用于体内和体外 ALD 模型，分别。CMA 的激活，测量肝损伤参数、炎性细胞因子、氧化应激和脂质代谢。结果 与 WT 同窝小鼠相比，Snx10 KO 小鼠在乙醇诱导的肝损伤和肝脂肪变性方面表现出显着改善。体内和体外研究均表明，SNX10 缺乏可上调溶酶体相关膜蛋白 2A (LAMP-2A) 表达和 CMA 激活，这可以通过体外 SNX10 过表达逆转。LAMP-2A 干扰证实 SNX10 缺陷诱导的 Nrf2 和 AMPK 信号通路的上调依赖于 CMA 激活。下拉分析揭示了 SNX10 和组织蛋白酶 A (CTSA) 之间的相互作用，组织蛋白酶 A (CTSA) 是一种参与 LAMP-2A 降解的关键酶。SNX10 的缺乏抑制了 CTSA 的成熟并增加了 LAMP-2A 的稳定性，导致 CMA 活性增加。结论 SNX10 通过介导 CTSA 成熟来控制 CMA 活性，因此，在酒精性肝损伤和脂肪变性中具有重要作用。我们的结果为 SNX10 作为预防或改善 ALD 肝损伤的潜在治疗靶点提供了证据。概述 酒精性肝病是全世界发病率和死亡率的主要原因。最近的研究强调了分子伴侣介导的自噬 (CMA) 参与调节肝脏脂质代谢。我们的研究表明，分选连接蛋白 (SNX) 10 的缺乏通过抑制组织蛋白酶 A 的成熟来增加 LAMP-2A 的稳定性，导致 CMA 活性增加，从而减轻酒精引起的肝损伤和脂肪变性。因此，在酒精性肝损伤和脂肪变性中具有重要作用。我们的结果为 SNX10 作为预防或改善 ALD 肝损伤的潜在治疗靶点提供了证据。概述 酒精性肝病是全世界发病率和死亡率的主要原因。最近的研究强调了分子伴侣介导的自噬 (CMA) 参与调节肝脏脂质代谢。我们的研究表明，分选连接蛋白 (SNX) 10 的缺乏通过抑制组织蛋白酶 A 的成熟来增加 LAMP-2A 的稳定性，导致 CMA 活性增加，从而减轻酒精引起的肝损伤和脂肪变性。因此，在酒精性肝损伤和脂肪变性中具有重要作用。我们的结果为 SNX10 作为预防或改善 ALD 肝损伤的潜在治疗靶点提供了证据。概述 酒精性肝病是全世界发病率和死亡率的主要原因。最近的研究强调了分子伴侣介导的自噬 (CMA) 参与调节肝脏脂质代谢。我们的研究表明，分选连接蛋白 (SNX) 10 的缺乏通过抑制组织蛋白酶 A 的成熟来增加 LAMP-2A 的稳定性，导致 CMA 活性增加，从而减轻酒精引起的肝损伤和脂肪变性。我们的结果为 SNX10 作为预防或改善 ALD 肝损伤的潜在治疗靶点提供了证据。概述 酒精性肝病是全世界发病率和死亡率的主要原因。最近的研究强调了分子伴侣介导的自噬 (CMA) 参与调节肝脏脂质代谢。我们的研究表明，分选连接蛋白 (SNX) 10 的缺乏通过抑制组织蛋白酶 A 的成熟来增加 LAMP-2A 的稳定性，导致 CMA 活性增加，从而减轻酒精引起的肝损伤和脂肪变性。我们的结果为 SNX10 作为预防或改善 ALD 肝损伤的潜在治疗靶点提供了证据。概述 酒精性肝病是全世界发病率和死亡率的主要原因。最近的研究强调了分子伴侣介导的自噬 (CMA) 参与调节肝脏脂质代谢。我们的研究表明，分选连接蛋白 (SNX) 10 的缺乏通过抑制组织蛋白酶 A 的成熟来增加 LAMP-2A 的稳定性，导致 CMA 活性增加，从而减轻酒精引起的肝损伤和脂肪变性。